domingo, 11 de diciembre de 2011

Mapa genético del plásmido de virulencia de Salmonella enteritidis y caracterización de regiones homologas del cromosoma de Salmonella typhi

Se ha procedido a la obtención del mapa génico del plásmido de virulencia de Salmonella enteritidis mediante la secuenciación parcial de subciones procedentes de la genoteca plasmídica hindill. Las secuencias obtenidas fueron enviadas a bancos de secuencias internacionales con el fin de detectar secuencias homólogas. De esta forma se han podido situar sobre el plásmido en estudio todos los genes anteriormente descritos en los distintos plásmidos de virulencia de diferentes serotipos de Salmonella; así como, detectar un nuevo orf no descrito hasta el momento cuya secuencia deducida de aminoácidos mostró homología con la endonucleasa nuc del plásmido pkm101. Se ha localizado y caracterizado la región tra del plásmido, la de máxima divergencia frente al plásmido de virulencia de Salmonella typhimurium, encontrándose incompleta con respecto a la del plásmido f. Se ha llevado a cabo la detección, localización y clonación de la región homóloga al plásmido de virulencia presente en el cromosoma de Salmonella typhi. Tras la secuenciación parcial de las regiones cromosómicas homólogas se determinó la presencia de secuencias correspondientes a pefl, orf7, orf8 y orf9 descritas en el plásmido de S. typhimurium. debido a que el producto deducido del orf8 presenta identidad con proteínas tipo dsba se realizo la secuenciación en doble cadena tanto del orf cromosómico de S. typhi como del plasmídico de S. enteritidis homólogos al orf8, denominándose dlt y dle respectivamente. Las secuencias de aminoácidos deducidas de las nucleotídicas obtenidas mostraron características propias de proteínas tipo dsba, pudiendo por tanto presentar esa misma actividad en Salmonella


http://eprints.ucm.es/tesis/19911996/D/1/AD1026801.pdf

martes, 29 de noviembre de 2011

Genes y plasmidos de Salmonella spp asociados con virulencia

Las serovariadades de Salmonella, patógenos intracelulares gran negativos, afectan varias especies animales como las aves, cerdos, los bovinos y el hombre.
Estos microorganismos requieren la expresión coordinada de muchos de los genes para causar una infección productiva en su hospedero .La Salmonella además utiliza u8n sistema de secreción tipo III como un mecanismo básico de virulencia, este sistema es el encargado de traslocar  proteínas hacia el citosol, las cuales interfieren con las señales de transducción y otros procesos celulares facilitando la patogénesis de la bacteria.
Algunas cepas de Salmonella contienen plásmidos que codifican genes de virulencia q están altamente asociadas con bacteremia y con la diseminación de la infección.
http://rccp.udea.edu.co/index.php/ojs/article/viewFile/12/11

domingo, 27 de noviembre de 2011

Mecanismos de interaccion de Salmonella


Aunque la exposición a Salmonella es frecuente se requiere de un numero de aproximadamente 10000000a 1000000000 bacterias para el desarrollo de la enfermedad sintomática.
Salmonella responde a la presencia de la célula hospedera por activación de un sistema especializado de secreción de proteínas llamadas TIPO III o de contacto, este sistema permite a ciertos bacilos gram negativos secretar eh inyectar proteínas de patogenicidad en el citosol de la célula hospedera eucariótica.
La isla de patogenicidad I es requerida para el ingreso de salmonella a la célula hospedera  está localizada en su centrosoma 63 y en ella se encuentran genes implicados en su patogenicidad.
Los genes SPI 1 son expresados en forma máxima a 37°c y bajo condiciones de oxigeno limitado, además la expresión es optima a PH neutro a alta osmolaridad, y durante la última fase de crecimiento.

http://www.revistainfectio.org/site/Portals/0/volumen7_1/MECANISMOS%20DE%20INTERACCION%20DE%20SALMONELLA%20CON%20LA%20MUCOSA%20INTEST.pdf

Mecanismos de infección


Una vez dentro del ambiente gastrointestinal, la bacteria es expuesta a extremas de temperatura, pH, sales biliales, enzimas digestivas y multitud de organismos competitivos que aparentemente hacen hostil el ambiente, no solamente es tolerado por la bacteria sino sirve como una señal al microbio para que este inicie la transcripción de genes específicos para su adaptación e interacción con el hospedador.

La Salmonella spp encuentra su camino por el tejido subepitelial, en este lugar se multiplica e induce una respuesta inflamatoria que se caracteriza por la presencia de gran número de leucocitos polimorfonucleares, debido a la liberación de interleucina-8 (IL-8).

La bacteria entra en las células por las microvellosidades o por vía de los complejos de unión entre los enterocitos, pero normalmente son encerradas por en el límite de una vacuola de la membrana que migra a la región basal de la célula.

El proceso de invasión de Salmonella es dependiente de microfilamentos funcionales. 
Sin embargo la síntesis de proteínas se requiere para el proceso de adhesión e invasión. La infección de S.typhimurium en células epiteliales cultivadas se acompaña por un marcado incremento en Ca2+ inorgánico. Una respuesta celular incluye fosforilación de tirosina de un número de proteínas del hospedador con el receptor del factor de crecimiento epidermal y la iniciación de la señal de traducción vía que al final lleva a la activación de la fosfolipasa A2 y producción de metabolitos de araquidonato.

Genes de Salmonella

RT-PCR analysis of Salmonella LSMMG-regulated genes. The expression of Salmonella genes identified by microarray analysis was analyzed using RT-PCR with total RNA from LSMMG and 1 × g HARV cultures as described in Materials and Methods. The ratio of the normalized quantitated signals is presented as the LSMMG value divided by 1 × g value. The DNA sequences of the primers used are published as supporting information on the PNAS web site. The prgI and ssaK genes are adjacent to other LSMMG-regulated genes in their respective operons. (A) LSMMG up-regulated genes. (B) LSMMG down-regulated genes.

jueves, 3 de noviembre de 2011

Clasificación de Salmonelosis en humanos

El género Salmonella se incluye en la familia Enterobacteriae, integrada por bacilos Gram negativos anaerobios facultativos.
Poseen por lo tanto las características generales de las enterobacterias, son fermentadoras de la glucosa, catalasa positiva, oxidasas negativo y suelen ser móviles. Representan una excepción Salmonella Gallinarum, siempre inmóvil.
Las Salmonelosis humanas pueden clasificarse en dos grandes grupos, unas debido a serotipos estrictamente humanos, que causan habitualmente síndromes tifoideos con presencia de bacterias en la sangre, y las debidas a serotipos ubicuos, que provocan diarrea, vómitos y fiebre. La duración y entidad de esta enfermedad es variable, dependiendo del estado general del huésped , pudiendo ocasionalmente causar enfermedades generalizadas.